石蠟包埋切片的HE染色法分色后用自來水或加數(shù)滴氨水堿化，直至細胞核變成藍色。這一步驟也可稱為“藍化”。入蒸餾水洗去堿性水分。入70%酒精→80%酒精各5分鐘。入伊紅染液染色30秒至數(shù)分鐘。以95%酒精對伊紅分色，至胞漿，結(jié)締組織等呈桃紅色。上行脫水：染色后的切片，因組織內(nèi)含水而不透明，不能清晰地觀察其微細結(jié)構(gòu)。因此，須將組織內(nèi)的水分經(jīng)各級酒精→無水酒精逐步置換，后進入不含水份的透明劑內(nèi)。透明：入二甲苯透明劑，二次（各數(shù)分鐘）。取出切片：將組織周圍多余的二甲苯擦去，滴樹膠后加蓋玻片封固。結(jié)果：細胞核藍紫色，胞漿、膠原纖維、肌纖維為桃紅色，嗜酸性顆粒為鮮紅色，彈性纖維呈明亮桃紅色。調(diào)整切片厚度調(diào)整器，以3-5um為宜，進行切片。切出的蠟片應(yīng)連續(xù)成完整的帶狀，用毛筆輕輕將蠟片托起，而后用眼科鑷夾起，正面向上放入水浴鍋的溫水中（水溫一般低于蠟熔點10-12℃，在45-50℃左右），待切片展平后，即可進行分片和撈片。每次展片完后，必須認真清理水面，不得遺留組織碎片，以防造成污染。將蠟片撈起并附貼于涂有蛋白甘油的載玻片上，撈片時應(yīng)注意蠟片位置（放在載玻片左或右2/3處中央），要留出貼標簽的空間，蠟片與載玻片之間應(yīng)無氣泡。撈起切片后，立即寫上編號?？酒簩⒁逊胖昧讼炂妮d玻片呈45o斜置片刻，待載玻片上的水分流下后插入切片架中，放入烤箱內(nèi)烘烤，一般在60℃烤箱內(nèi)烤30-60min，也可用烤片器烤片。經(jīng)烘烤后，蠟熔化，切片牢固的貼于載玻片上。組織固定后，要除去組織中滲入的固定液和固定液產(chǎn)生的沉淀、結(jié)晶、色素等物質(zhì)，否則會影響以后的染色效果，該過程即為固定后處理。處理方法要根據(jù)固定液來選擇，經(jīng)過中性多聚甲醛固定的組織一般采用流水沖洗24小時來處理（在流水沖洗之前，可對組織塊進行適當?shù)男拚?，便于包埋和切片的制作）。此外，含鈣組織，如：骨、牙齒等，在沖洗之后還應(yīng)進行脫鈣處理。一般采用EDTA對含鈣組織盡行脫鈣處理，此法對組織無損傷，脫鈣速度慢，酶活性保留，對組織抗原損傷小。