二組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)染色法組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)，是將物理和化學(xué)的技術(shù)運用到組織標(biāo)本，用顯微鏡和化學(xué)分析方法來研究組織和細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)成分，并觀察該化學(xué)成分在組織、細(xì)胞內(nèi)的定位、含量及其變化規(guī)律。這些化學(xué)成分借著化學(xué)反應(yīng)所產(chǎn)生的不溶性著色物質(zhì)來顯示。對于某些化學(xué)成分，例如：Fe 糖原、核酸等，可以用直接或間接的化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生著色沉淀而顯示其部位和相對含量。對于酶類，顯示它的活性，須有該種酶的底物（被該種酶作用的物質(zhì)），由酶對底物的分解，直接或間接地生成著色物質(zhì)而被顯示。凡是在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞原位顯示的化學(xué)物質(zhì)，稱組織化學(xué)，若用電鏡觀察細(xì)胞原位化學(xué)成分的著色部位，則稱電鏡細(xì)胞化學(xué)，透明①二甲苯的容積應(yīng)為組織塊總體積的5-10倍以上。②組織塊在二甲苯中透明的時間，應(yīng)根據(jù)組織的種類和組織塊的大小及液體的新鮮程度適當(dāng)進(jìn)行調(diào)整，如腦組織和血凝塊應(yīng)縮短在二甲苯中的留置時間，而肌肉組織應(yīng)延長在二甲苯中的留置時間。③如組織塊進(jìn)入二甲苯時出現(xiàn)渾濁或組織塊經(jīng)二甲苯適度處理后仍不顯透明時，說明該組織脫水不充分，應(yīng)查找原因。④二甲苯應(yīng)及時過濾、更換。浸蠟①浸蠟要掌握適宜恒溫，溫度一般高于石蠟熔點2-3℃即可，一般保持在65℃為宜。若溫度偏低時，石蠟開始凝集，則達(dá)不到浸蠟的目的，溫度過高，浸蠟的組織常出現(xiàn)收縮變硬，同時，組織中的抗原易被破壞，因而影響免疫組化酶標(biāo)記染色。②浸蠟所用時間可根據(jù)組織塊的大小適當(dāng)調(diào)整，活檢的各種小標(biāo)本及動物實驗標(biāo)本取的組織塊一般較小，上述浸蠟時間應(yīng)相對縮短，浸蠟總時間以1h為宜。③熔蠟的容積應(yīng)為組織塊總體積的5-10倍以上。④應(yīng)盡量減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。⑤浸蠟用的石蠟也要定期更換，以度，大約1個月左右調(diào)換一次。下列的各種切片方法基本上屬于制作玻片的各種切片方法。切片前會因應(yīng)材料特性要作某些處理，切片后，便進(jìn)入染色及制片的階段。徒手切片:意即僅用雙手及刀片來切片的方法。若材料過小，可置于干燥的通草髓中，再徒手切片。木材切片：木材由于質(zhì)堅硬，不易進(jìn)行切片，需要先裁取適當(dāng)?shù)拇笮?通常為0.5×0.5×4厘米，適于切片機(jī)的大小)以煮沸法去除材料中的氣體，再將材料軟化(軟化劑如甘油、三甘醇)，軟化后的材料再以切片機(jī)進(jìn)行切片。埋蠟切片：將材料埋于蠟塊中，再連同蠟塊一同切片，切片完再將材料里的石蠟去除的方法。