①新鮮恒冷箱冷凍切片，厚6~8μm，平貼在蓋玻片上。②滴染法：將有冷凍切片的蓋玻片（標(biāo)本面朝上）平放于預(yù)熱好的培養(yǎng)皿中（底部墊一濕濾紙），滴加孵育液至全部覆蓋組織，于37℃溫箱中孵育45~60分鐘（肝，心肌組織15分鐘即可）。③于生理鹽水中沖洗二次（輕晃，以防脫片）。④10%福爾馬林生理鹽水固定10分鐘。⑤15%酒精浸洗5分鐘（換二次）。⑥甘油明膠封片。結(jié)果：酶活性強(qiáng)處呈藍(lán)色顆粒（雙甲沉淀），酶活性較低時(shí)形成紫紅色單甲。在光鏡下，該酶活性于肝小葉內(nèi)分布呈明顯分帶現(xiàn)象，周邊帶強(qiáng)于中央帶。在心肌細(xì)胞縱切面，酶活性顆粒沿心肌細(xì)胞長(zhǎng)軸整齊排列，相鄰心肌細(xì)胞的空白處為閏盤(pán)。制作方法脫水：是將組織細(xì)胞所含水分除去。通常用乙醇（Alcohol，酒精），濃度遞升到。此過(guò)程還使組織塊進(jìn)一步硬化。透明：是用既能溶于酒精又能融解石蠟的有機(jī)溶劑，將組織中的酒精取代，以便石蠟浸入。通常用二甲苯（xylene）為透明劑。浸蠟：在溫箱內(nèi)進(jìn)行。已透明的組織塊放入加熱融解的石蠟中，讓石蠟浸透組織，作為支持介質(zhì)。包埋：將已浸蠟的組織塊放入熱融的包埋石蠟中，迅速冷凝，組織決便被蠟包埋。切片：用切片機(jī)。常用的切片機(jī)有輪轉(zhuǎn)式、平推式的。用輪轉(zhuǎn)式的易于切出連續(xù)切片。切片厚度隨制片目的而調(diào)整。教學(xué)標(biāo)本厚度多是5~6μm。貼片烤干：石蠟切片在溫水上展平后，移在玻片上，烤干，即可供染色處理。染色后用樹(shù)膠、蓋坡片封固，可保存。包埋①包埋一般用硬蠟，即熔點(diǎn)為60-62℃的石蠟。包埋用的石蠟熔點(diǎn)要和浸蠟用的石蠟熔點(diǎn)相一致。②包埋用的石蠟溫度藥稍高于浸蠟的溫度，維持在65-68℃，但是不可過(guò)高，否則易造成組織的燙傷，而實(shí)驗(yàn)結(jié)果。③包埋過(guò)程操作要迅速，以免在組織塊尚未埋妥前熔蠟?zāi)?。④黏膜、囊壁、皮膚組織必須垂直于包埋盒的地面包埋，習(xí)慣稱(chēng)為立埋或立包。血管壁也應(yīng)立埋。切片①切片刀要鋒利，刀口無(wú)缺損，才能切出完整的薄片。目前多用一次性刀片切片，切片質(zhì)量良好。若用重型全鋼刀，則要經(jīng)常研磨，以保持其鋒利、無(wú)缺損。②骨與其它鈣化組織必須先脫去鈣鹽，再經(jīng)述各步驟處理后，才能切片。