①新鮮恒冷箱冷凍切片，厚6~8μm，平貼在蓋玻片上。②滴染法：將有冷凍切片的蓋玻片（標本面朝上）平放于預熱好的培養(yǎng)皿中（底部墊一濕濾紙），滴加孵育液至全部覆蓋組織，于37℃溫箱中孵育45~60分鐘（肝，心肌組織15分鐘即可）。③于生理鹽水中沖洗二次（輕晃，以防脫片）。④10%福爾馬林生理鹽水固定10分鐘。⑤15%酒精浸洗5分鐘（換二次）。⑥甘油明膠封片。結果：酶活性強處呈藍色顆粒（雙甲沉淀），酶活性較低時形成紫紅色單甲。在光鏡下，該酶活性于肝小葉內分布呈明顯分帶現(xiàn)象，周邊帶強于中央帶。在心肌細胞縱切面，酶活性顆粒沿心肌細胞長軸整齊排列，相鄰心肌細胞的空白處為閏盤。固定具有凝固或沉淀組織蛋白的作用，因此能抑制酵解酶類的活動和細菌的繁殖，從而呈現(xiàn)對組織的固定作用（1）10%福爾馬林液：1份甲醛液+9份蒸餾水市場上出售的甲醛液約含37-40%的甲醛，10%福爾馬林液實際上僅含3.7-4.0%的甲醛適用范圍：各種組織。但是經(jīng)10%福爾馬林液固定的組織，細胞核染色較好，而細胞質染色較差處理：組織塊一般固定24h以上，長時間亦可，甚至可用來長期保存組織塊。短時間固定的組織塊不需水洗，可直接轉入70%酒精脫水（2）Bouin氏液：苦味酸飽和水溶液（1.22%）75ml甲醛液25ml冰醋酸5ml適用范圍：各種動物組織及植物組織的根尖，是動物組織良好的固定液處理：固定24h，也可在此液長期保存。流水沖洗或不經(jīng)水洗直接入70%酒精脫水。二組織化學和細胞化學染色法組織化學和細胞化學，是將物理和化學的技術運用到組織標本，用顯微鏡和化學分析方法來研究組織和細胞內的化學成分，并觀察該化學成分在組織、細胞內的定位、含量及其變化規(guī)律。這些化學成分借著化學反應所產(chǎn)生的不溶性著色物質來顯示。對于某些化學成分，例如：Fe++糖原、核酸等，可以用直接或間接的化學反應產(chǎn)生著色沉淀而顯示其部位和相對含量。對于酶類，顯示它的活性，須有該種酶的底物（被該種酶作用的物質），由酶對底物的分解，直接或間接地生成著色物質而被顯示。凡是在光學顯微鏡下觀察細胞原位顯示的化學物質，稱組織化學，若用電鏡觀察細胞原位化學成分的著色部位，則稱電鏡細胞化學，