超聲乳化,DH-IIE是一種利用強超聲在液體中產(chǎn)生空化效應(yīng),對物質(zhì)進(jìn)行超聲處理的多功能、多用途的儀器,能用于動植物組織、細(xì)胞、細(xì)菌、芽胞菌種的破碎,同時可用來乳化、分離、分散、勻化、提取、脫氣、清洗及加速化學(xué)反應(yīng)等等。該機廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、微生物學(xué)、藥物化學(xué)、表面化學(xué)、物理學(xué)、動物學(xué)、農(nóng)學(xué)、醫(yī)學(xué)、制藥等領(lǐng)域教學(xué)、科研、生產(chǎn)。
隨著生物產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,應(yīng)用超聲波細(xì)胞粉碎機所做的實驗要求也隨之提高,如對樣品溫度的測定、控制,低溫冷卻樣品及整機的智能化程度的提高等等,都提出了新的要求。
為進(jìn)一步完善超聲儀器的各項性能,我公司在現(xiàn)有各種型號超聲波細(xì)胞粉碎機的基礎(chǔ)上,結(jié)合微電腦控制、選頻、測溫、保護(hù)等軟硬件技術(shù)而研制的E型超聲波細(xì)胞粉碎機,帶有RS485接口,可與上位微機實現(xiàn)通訊,在隨機所附的軟件支撐下,對超聲波細(xì)胞粉碎機進(jìn)行參數(shù)預(yù)置和多機群控。具有技術(shù)先進(jìn)、性能可靠、操作簡便、外型美觀、顯示清晰明亮、測溫控溫精確等優(yōu)點。
用途:
※用于動植物細(xì)胞、細(xì)菌、芽孢或組織的粉碎,從細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)以及進(jìn)行病毒、疫苗的科學(xué)培養(yǎng)實驗。
※加速化學(xué)、物理學(xué)等的反應(yīng)速度和加速液體脫氣。
※原油稀釋、油水乳化、加速脫晶,玻璃均漿等進(jìn)行的科研分析。
※分散稀土,各類無機礦物質(zhì),以及配制近納米百分之一的乳膠體均化混合物等。
※模具微孔,盲孔的快速強力高精洗液。
實驗?zāi)康?br/>1、了解超聲細(xì)胞破碎的基本原理
2、掌握超聲細(xì)胞破碎的基本技術(shù)
實驗原理
強聲波作用溶液時,氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
材料和試劑
細(xì)菌10ml、燒杯、刨冰、75%酒精棉球
探頭型號大小 破碎細(xì)胞容量
2mm 150ul-5ml
3mm 200ul-10ml
6mm 10ml-50ml
10mm 50ml-150ml
超聲乳化,DH-IIE基本參數(shù)
型號 DH-IIE
頻率 20-25KHz(自動跟蹤)
功率 950W
隨機變幅桿 Φ6
可選變幅桿 Φ3、12
破碎容量 50-1000ml
占空比 1-99%
功率調(diào)節(jié)范圍 連續(xù)可調(diào)(20-950w)
間隙時間 0.1-99.9s
溫度保護(hù)設(shè)定 有
功率振幅顯示 有
登陸保護(hù) 有
打印功能 有
通訊接口 RS422
工作頻率范圍 自動跟蹤
工作時間 0-999(m)
工作計時方式 正序
超聲時間 0.1-99.9s
工作模式 間隙/連續(xù)
監(jiān)控曲線 溫度/功率/振幅
輸入方式 觸控
顯示界面 7寸 TFT
電源 220/110V 50Hz/60Hz
電源機箱尺寸 400×280×220mm
凈重 12.1kg
主機+換能器重量 14.5kg
外包裝尺寸 534×295×435mm
細(xì)胞破碎的方法:
一、機械破碎法:是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開來 。
1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至最慢處,開動開關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。
2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細(xì)胞研碎,此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。
二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開來。
1:用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器)。
機制:可能與強聲波作用溶液時,氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類型等。(使用時注意降溫,防止過熱)。
2. 高壓破碎:細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內(nèi)含物。
這是一種溫和的、徹底破碎細(xì)胞的較理想的方法。
3. 反復(fù)凍融法:將細(xì)胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。
三、化學(xué)破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜,使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。
有些動物細(xì)胞,例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。
四、酶學(xué)破碎法 :選用合適的酶,使細(xì)胞壁遭到破壞,進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開來 。
細(xì)菌細(xì)胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
裂解液標(biāo)準(zhǔn)配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。
綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細(xì)胞,都會使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應(yīng)該在破碎的同時多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。
使用前注意事項:
1.根據(jù)所處理的樣本體積選擇適當(dāng)探頭,使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛專用扳手更換;
2.AMPLITUDE旋鈕打開時,探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測試探頭)不應(yīng)超過10秒;
3.使用前準(zhǔn)備好冰盒,樣品處理時必須置于冰浴中,樣品濃度不可過大。