ELISA檢測試劑盒-大鼠 小鼠等ELISA檢測試劑盒
在世界范圍內(nèi)用于治療多種廣泛的x癥。它們以各自的商標(biāo)名作為藥品銷售:Avastin®,Erbitux®和Herceptin®。這項(xiàng)研究的目的是開發(fā)內(nèi)部特異性酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA),以評估這三種單克隆抗體的長期穩(wěn)定性。這些測定法通過量化單克隆抗體的生物學(xué)活性來評估其生物學(xué)功能。為此,我們開發(fā)了一種間接ELISA程序,將針對mAb的特異性抗原用作ELISA板上的特異性“捕獲”抗體。因此,我們在BVZ的ELISA中使用了血管內(nèi)皮生長因子(VEGF); CTX ELISA中的人類表皮生長因子受體(hEGFR)和TTZ ELISA中的人類受體HER2(hHER2)。在單克隆抗體附著其抗原后,我們使用抗人IgG(整個分子)過氧化物酶結(jié)合物和鄰苯二胺二鹽酸鹽底物。用硫酸終止反應(yīng),并在450nm的波長處記錄吸光度。三種ELISA方法在校準(zhǔn)模型,測定范圍,檢測和定量限,日內(nèi)和日間精度和準(zhǔn)確性以及交叉反應(yīng)的特異性方面得到了驗(yàn)證。還對藥物進(jìn)行了強(qiáng)制降解研究,提供了有用的信息。最終,擬議的ELISA成功地用于長期穩(wěn)定性研究中,以量化已打開并隨后在兩種不同的存儲條件下(即在4°C下冷藏并在-20°C下冷凍)的藥物的剩余生物活性。結(jié)果表明,就其生物學(xué)功能而言,BVZ(Avastin®)是這三種中最穩(wěn)定的。
Tau病理學(xué)與阿爾茨海默氏?。ˋD)進(jìn)展之間的密切相關(guān)性使該蛋白成為診斷和監(jiān)測疾病進(jìn)展的合適生物標(biāo)志物。但是,由于目前需要收集腦脊液(CSF),這是一種侵入性臨床程序,因此Tau在診斷中的使用受到了阻礙。盡管測量血漿中的Tau水平會比較有利,但其濃度低于常規(guī)ELISA的檢測極限。在這項(xiàng)工作中,我們開發(fā)了一種數(shù)字ELISA,用于定量緩沖液和生物樣品中阿托莫拉蛋白Tau的濃度。首先使用內(nèi)部開發(fā)的抗體將單個Tau分子捕獲在磁性粒子的表面,然后分離到2×2×mm2微孔陣列的飛升大小的孔中。高親和力抗體,最佳測定條件和數(shù)字量化方法的結(jié)合導(dǎo)致緩沖液樣品的檢測限(LOD)為24±±7 aM。此外,通過將數(shù)字讀數(shù)與模擬方法相結(jié)合,可以實(shí)現(xiàn)6個數(shù)量級的動態(tài)范圍,從而可以使用同一平臺對Tau的摩爾濃度至皮摩爾濃度進(jìn)行定量。這證明了本發(fā)明的測定方法與不同生物樣品中遇到的各種Tau濃度的兼容性。接下來,將開發(fā)的數(shù)字化驗(yàn)用于檢測加標(biāo)血漿中的總Tau水平。與緩沖液樣品相比,獲得了相似的LOD(55±±29 aM),其靈敏度是市售ELISA的5000倍,甚至比以前報道的數(shù)字化檢測的靈敏度提高了10倍。最后,通過定量三個臨床CSF樣品中的蛋白質(zhì)Tau來評估開發(fā)的數(shù)字ELISA的性能。在此,在測量的活性顆粒百分比與參考蛋白Tau值之間發(fā)現(xiàn)高度相關(guān)性(即,皮爾森系數(shù)為0.99)。提出的數(shù)字ELISA技術(shù)具有很大的潛力,可以挖掘Tau作為早期AD診斷的生物標(biāo)志物的潛力。